การวิเคราะห์ PCR คืออะไร?
การวิเคราะห์ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ (PCR) เป็นเทคนิคในห้องปฏิบัติการที่ออกแบบมาเพื่อระบุจำนวน DNA ขนาดเล็กในตัวอย่างโดยกระบวนการที่เรียกว่าการ ขยาย ในระหว่างการขยาย PCR DNA ที่น่าสนใจจะถูกคัดลอกซ้ำ ๆ จนกว่าจะมีเพียงพอสำหรับการวิเคราะห์และตรวจจับ ตัวอย่างเช่น PCR สามารถใช้เพื่อระบุจำนวน DNA ขนาดเล็กจากสิ่งมีชีวิตที่ก่อให้เกิด โรคหนองใน หรือ chlamydia ที่มีอยู่ใน ตัวอย่างปัสสาวะ
PCR Work ทำงานได้อย่างไร?
ขั้นตอนแรกใน PCR คือการให้ความร้อนแก่ตัวอย่างเพื่อให้ดีเอ็นเอแบบคู่นี้แยกออกเป็นสองเส้นเดี่ยวนี้เรียกว่าการ ทำให้เกิดการสึกหรอ ตัวอย่าง ไพรเมอร์ ตัวอย่างสั้น ๆ ของดีเอ็นเอที่ตรงกับจุดสิ้นสุดของลำดับดีเอ็นเอที่น่าสนใจจะถูกรวมเข้ากับตัวอย่างดีเอ็นเอ หลังจากนั้นจะใช้ดีเอ็นเอ โพลิเมอร์ เพื่อเริ่มต้นการจำลองแบบดีเอ็นเอในตำแหน่งไพรเมอร์ สุดท้าย DNA ถูกให้ความร้อนเพื่อแยกเส้นอีกครั้งและกระบวนการ PCR ทั้งหมดจะเริ่มขึ้นอีกครั้ง
ปริมาณของส่วนดีเอ็นเอที่น่าสนใจที่มีอยู่ในตัวอย่างจะเพิ่มขึ้นอย่างมากในแต่ละรอบของ PCR: สำเนาหนึ่งเล่มกลายเป็นสองฉบับแล้วกลายเป็นสี่ส่วนแล้วกลายเป็นแปด ฯลฯ ดังนั้นโดยทั่วไปจำเป็นต้องมีเพียง 20 ถึง 40 รอบเพื่อตรวจสอบว่ามี DNA อยู่ในคำถาม (และถ้าเป็นเช่นนั้นเพื่อให้เป็นตัวอย่างที่เพียงพอสำหรับการวิเคราะห์)
ทุกขั้นตอนของปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ - denaturing DNA, การใช้ไพรเมอร์และยืด DNA - เกิดขึ้นที่อุณหภูมิที่แตกต่างกันดังนั้นหลังจากผสมเริ่มต้นจะใส่กันขั้นตอนสามารถควบคุมได้ผ่านกระบวนการที่เรียกว่า thermocycling , ซึ่งอุณหภูมิจะอยู่ในระดับที่จำเป็นสำหรับระยะเวลาที่เพียงพอสำหรับแต่ละขั้นตอน
ดังนั้น PCR เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพในการขยายปริมาณของดีเอ็นเอเป้าหมายในหลอดทดลองเดี่ยวที่มีความต้องการเพียงเล็กน้อยสำหรับการแทรกแซงของมนุษย์
ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอร์เป็นการปฏิวัติทางชีววิทยาเมื่อได้รับการพัฒนาขึ้นเป็นครั้งแรกในช่วงต้นทศวรรษ 1980 และผู้สร้าง KARA Mullis ของ PCR ได้รับรางวัลโนเบลสาขาเคมีในการทำงานของเขาในปีพ. ศ. 2536
PCR มีความเกี่ยวข้องกับการทดสอบ STD ทำไม?
ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์และเทคนิคที่เกี่ยวข้องเช่น ปฏิกิริยาลูกโซ่ ligase พิสูจน์ให้เห็นว่ามีความสำคัญเพิ่มขึ้นสำหรับการทดสอบเชื้อ STD เนื่องจากเทคนิคเหล่านี้สามารถระบุจำนวน DNA หรือ RNA ไวรัสในตัวอย่างได้เล็กน้อย การระบุรหัสพันธุกรรมของเชื้อโรคไม่จำเป็นต้องมีเชื้อโรคที่จะมีชีวิตอยู่เช่น วัฒนธรรมแบคทีเรีย หรือ การเพาะเชื้อไวรัส นอกจากนี้ยังไม่จำเป็นต้องมีการติดเชื้อเกิดขึ้นเป็นเวลานานพอสมควรสำหรับคนที่ได้พัฒนาปฏิกิริยาแอนติบอดีที่ตรวจพบได้ (เช่นได้รับการตรวจพบโดย ELISA ) ซึ่งหมายความว่าเทคนิค PCR สามารถตรวจพบโรคได้เร็วกว่าการทดสอบอื่น ๆ และไม่มี เท่าที่จำเป็นต้องกังวลเกี่ยวกับการรักษาตัวอย่างที่มีชีวิตอยู่หรือการทดสอบที่ตรงเวลาที่เหมาะสม